暗場生物顯微鏡是一種利用斜射照明法,以反射光和衍射光來觀察標本的光學(xué)顯微鏡,以下將從其原理、結(jié)構(gòu)、使用方法、應(yīng)用場景等維度展開詳細介紹:
工作原理
阻擋直射光:通過在聚光鏡下方設(shè)置不透明的光闌或使用特殊設(shè)計的暗場聚光鏡,阻擋透過標本細節(jié)的直射光,使光線從側(cè)面以傾斜角度照射到標本上。
光的散射與反射:當傾斜光線照射到標本上時,標本中的微小顆?;蚪Y(jié)構(gòu)會使光線發(fā)生散射、反射和折射。這些散射光和反射光進入物鏡,而其他未與標本相互作用的直射光則無法進入物鏡,從而在暗背景上形成明亮的物體影像。
關(guān)鍵部件
暗場聚光鏡:是暗場顯微鏡的核心部件,常見的類型有拋物面聚光鏡、心形聚光鏡和同心球面聚光鏡。其作用是將光線以特定的角度會聚到標本上,產(chǎn)生斜射照明效果,使標本產(chǎn)生散射光和反射光。
物鏡:用于收集標本散射和反射的光線,并將其放大成像。通常需要使用干燥系物鏡中鏡口率在0.85以下的物鏡,以避免除微粒子反射的光束以外的旁射光束進入物鏡前透鏡,干擾暗視野成像效應(yīng)。
光源:由于暗場顯微鏡中光能損失較大,因此需要選擇光強較大的光源,如鹵素?zé)簟⒐療艋騆ED燈等,以提供足夠的照明強度,使標本能夠產(chǎn)生清晰的散射光圖像。